1  试验配景

加州鲈原名大口黑鲈，，，，，，，，分类学上属鲈形目，，，，，，，，太阳鱼科，，，，，，，，原产美国加利福尼亚州密西西比河水系，，，，，，，，是一种肉质鲜美、抗病力强、生长迅速、易起捕、适温较广的名贵肉食性鱼类。。。。。。。。我国于上世纪80年
代引进加州鲈鱼苗，，，，，，，，并人工滋生乐成。。。。。。。。2018年天下加州鲈产量达43.21万吨，，，，，，，，成为名副着实的明星鱼。。。。。。。。虽然现在加州鲈的苗种驯化、养殖、饲料手艺等日趋成熟，，，，，，，，但普遍还保存放养密度过大、投喂过
量、水质底质恶化、频仍消毒用药、投喂冰鲜鱼等情形。。。。。。。。这些情形都会导致加州鲈爆发肝脏病变，，，，，，，，造成鱼体免疫力下降、代谢杂乱、易熏染其他病原性疾病，，，，，，，，殒命率增高，，，，，，，，有的塘口殒命率可高达50%
以上，，，，，，，，给养殖户造成重大的经济损失。。。。。。。。

另外，，，，，，，，加州鲈养殖中为了追求生长速率，，，，，，，，太过投喂饲料或者是冰鲜，，，，，，，，由于加州鲈摄食量大，，，，，，，，投喂的饲料或冰鲜也多，，，，，，，，过多的投喂造成铺张会残留在水体中造成水体的污染，，，，，，，，当水质转变，，，，，，，，溶氧低等
引起鱼体对抗力下降，，，，，，，，会使得加州鲈患肠炎病的几率大大增添。。。。。。。。因此加州鲈的肝肠问题亟待解决。。。。。。。。

bifa必发舒^?主要成份组成：黄芪提取物、杜仲提取物、金银花提取物、苦木提取物等植提复方，，，，，，，，具有“抑菌杀菌与抗病毒+提高免疫与抗病力+；；；；；；；；の赋︷つて琳稀比灰惶遄酆细纳聘纬到，，，，，，，，提高
抗病力、促生长的效果。。。。。。。。本试验以加州鲈为研究工具，，，，，，，，评价bifa必发舒在加州鲈养殖中的应用效果，，，，，，，，重点考察bifa必发舒对加州鲈生长性能、免疫功效和肝肠康健的改善作用。。。。。。。。

2  试验目的

研究饲料中添加差别水平bifa必发舒对加州鲈生长、消化、免疫功效及抗应激的影响，，，，，，，，确定bifa必发舒的应用效果及饲料中最佳添加水平。。。。。。。。

3  试验设计

3.1  试验工具

选择加州鲈为试验动物，，，，，，，，初均重5.3g左右。。。。。。。。

3.2  试验组别

每个处置惩罚3个重复，，，，，，，，每个重复25尾加州鲈，，，，，，，，试验周期8周。。。。。。。。      

养殖条件：天天2次（8:00和16:00）表观餍饫投喂。。。。。。。。整个养殖系统不中止充气, 水体消融氧含量≥6mg/L, 氨氮为（0.15±0.05）mg/L, pH 为（7.2±0.2）, 温度为（25±2）℃ 。。。。。。。。养殖实验时代接纳自然光
照周期。。。。。。。。 

使用试剂盒剖析血清免疫指标、肝脏抗氧化和消化酶指标，，，，，，，，高通量测序剖析肠道微生物组成，，，，，，，，组织切片法和电镜剖析肝脏及肠道组织形态。。。。。。。。

4  试验效果

4.1 bifa必发舒对加州鲈生长性能的影响

由表2可知，，，，，，，，饲料中添加0.03%、0.05%、0.075%和0.1%bifa必发舒，，，，，，，，养殖试验时代加州鲈存活率均为100%，，，，，，，，增重率、特定生长率、采食量均泛起差别水平的提高。。。。。。。。其中，，，，，，，，饲料中添加0.075%bifa必发舒的加州鲈
增重率、特定生长率、采食量均显著增添（P＜0.05），，，，，，，，增重率较比照组增添了9.62%。。。。。。。。饲料中添加bifa必发舒的加州鲈平均肥满度有一定水平提高，，，，，，，，鱼体形态更为雅观。。。。。。。。这些效果提醒饲料中添加一定量的bifa必发舒能
提高加州鲈采食量和生长性能，，，，，，，，改善形体指标。。。。。。。。

4.2 bifa必发舒对加州鲈血清免疫指标的影响

由表3可知，，，，，，，，饲料中添加0.03%、0.05%、0.075%和0.1%的bifa必发舒均显著提高了加州鲈血清AKP活性（P＜0.05），，，，，，，，实验组和比照组血清ACP和IgM差别不显著，，，，，，，，添加0.05%、0.075%和0.1%的bifa必发舒血清
补体C3活性有一定上升。。。。。。。。这些效果提醒bifa必发舒能一定水平上提高加州鲈免疫功效。。。。。。。。

4.3 bifa必发舒对加州鲈肝脏消化和代谢酶活性的影响

由表4可知，，，，，，，，饲料中添加0.03%、0.05%、0.075%和0.1%的bifa必发舒各组淀粉酶活性无显著差别，，，，，，，，脂肪酶活性呈差别水平上升，，，，，，，，其中0.03%组显著上升（P＜0.05）。。。。。。。。饲料中添加0.03%和0.1%的bifa必发舒肝脏
胰卵白酶活性显著下降（P＜0.05），，，，，，，，饲料中添加0.05%、0.075%的bifa必发舒肝脏胰卵白酶活性无显著影响。。。。。。。。饲料中添加bifa必发舒加州鲈肝脏ALT活性均显著高于比照组，，，，，，，，AST活性高于比照组，，，，，，，，但差别不显著。。。。。。。。这
些效果提醒饲料中添加一定含量的bifa必发舒能够改善加州鲈肝脏代谢。。。。。。。。

4.4 bifa必发舒对加州鲈肝脏抗氧化能力的影响

由表5可知，，，，，，，，饲料中添加0.03%、0.05%、0.075%和0.1%的bifa必发舒均能提高加州鲈肝脏总氧化酶活性，，，，，，，，其中0.075%bifa必发舒组试验效果最为显着，，，，，，，，总抗氧化能力活性较比照组提高了71.4%，，，，，，，，并显着降低了
加州鲈肝脏MDA含量。。。。。。。。0.05%bifa必发舒能显著提高加州鲈肝脏GSH-PX活性，，，，，，，，0.03%bifa必发舒能显著提高加州鲈肝脏SOD活性（P＜0.05）。。。。。。。。这些效果提醒饲料中添加bifa必发舒可提高加州鲈抗氧化能力。。。。。。。。

4.5 bifa必发舒对加州鲈肝脏组织形态的影响

凭证现场采样情形（图1），，，，，，，，收罗的肝脏颜色总体呈暗红色，，，，，，，，形态正常，，，，，，，，均未泛起脂肪肝征象，，，，，，，，就整体而言，，，，，，，，试验组的肝脏体积较比照组稍大一点，，，，，，，，其他并无显著差别。。。。。。。。

由图2可视察，，，，，，，，加州鲈伸入肝脏实质内结缔组织较少肝组织致密，，，，，，，，肝小叶间界线不是十明确显，，，，，，，，低倍镜下可大致区分出肝小叶和门管区结构。。。。。。。。肝小叶以中央静脉为中心，，，，，，，，肝细胞索在其周围呈不规则的放
射状排列，，，，，，，，胆细胞索间的血窦较为显着。。。。。。。。效果提醒在饲料中添加bifa必发舒并不会对肝脏的组织形态造成影响。。。。。。。。

4.6 bifa必发舒对加州鲈肠道组织结构及其屏障的影响

凭证图3显示，，，，，，，，加州鲈肠道黏膜为纵行黏膜褶皱，，，，，，，，黏膜上皮外貌具有许多渗透孔及较多腺体导管的启齿，，，，，，，，似鳞片状，，，，，，，，毗连细密。。。。。。。。肠黏膜漫衍着麋集排列的肠绒毛，，，，，，，，绒毛呈拇指状或扁平状。。。。。。。。肠上皮外貌呈
脑回状漫衍有许多渗透颗粒，，，，，，，，细胞游离面漫衍着富厚的微绒毛，，，，，，，，其中0.075%试验组较比照组褶皱越发细密，，，，，，，，肠绒毛更为麋集，，，，，，，，漫衍着更为富厚的微绒毛。。。。。。。。

肠上皮屏障是由肠上皮细胞和细胞间的细密毗连所组成，，，，，，，，细密毗连是处于细胞间最顶端的结构，，，，，，，，认真细胞与细胞间的粘附，，，，，，，，极性以及对一些电解质的通透性。。。。。。。。一旦粘膜屏障被破损，，，，，，，，粘膜下层将会袒露于
大宗的病原微生物下，，，，，，，，从而加剧肠道炎症的生长，，，，，，，，因此维持细密毗连卵白的表达正常关于；；；；；；；；こΦ榔琳，，，，，，，，具有主要意义。。。。。。。。因此我们检测了空肠细密毗连卵白相关基因ZO-1、Claudin-1和Claudin-4基因相对
表达水平，，，，，，，，从图4中可以看出，，，，，，，，与正常比照组较量，，，，，，，，0.03%、0.05%和0.075%bifa必发舒处置惩罚组空肠细密毗连卵白相关基因ZO-1、Claudin-1和Claudin-4的基因相对表达水平均有差别水平的提高，，，，，，，，其中0.075%
bifa必发舒处置惩罚组空肠细密毗连卵白相关基因ZO-1、Claudin-1和Claudin-4的基因相对表达水平提高最为显著（P＜0.05）。。。。。。。？？？？？？？？杉，，，，，，，，饲料中添加bifa必发舒可以改善加州鲈肠道组织结构，，，，，，，，并且有利于提高肠道物理屏
障相关基因的表达。。。。。。。。 

4.7 bifa必发舒对加州鲈肠道微生物的影响

由图5可知，，，，，，，，在门水平，，，，，，，，各组加州鲈肠道的优势菌为厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、酸杆菌门、放线菌门等，，，，，，，，0.075%试验组厚壁菌门、拟杆菌门品貌略低于比照组，，，，，，，，而梭杆菌门品貌显着上升。。。。。。。。在属水
平，，，，，，，，0.075%试验组鲸杆菌（常见有益菌）品貌显着上升。。。。。。。。PCoA剖析和β-多样性显著性剖析（图6）均批注，，，，，，，，试验组与比照组加州鲈肠道菌群β-多样性保存一定差别，，，，，，，，尤其是0.075%试验组差别较大。。。。。。。？？？？？？？？杉，，，，，，，，
饲料中添加bifa必发舒对加州鲈肠道菌群结构爆发了一定的调理作用。。。。。。。。

5 试验结论

5.1  饲料中添加0.03-0.10%的bifa必发舒均能提高加州鲈采食量、生长性能和肥满度。。。。。。。。0.075%添加效果最佳，，，，，，，，增重率较比照组提高了9.62%。。。。。。。。

5.2 饲料中添加0.03-0.10%的bifa必发舒能改善加州鲈免疫功效、抗氧化能力和肝脏代谢。。。。。。。。

5.3 饲料中添加0.075%的bifa必发舒能有用改善加州鲈肠道组织结构和菌群结构，，，，，，，，上调肠道物理屏障相关基因的表达。。。。。。。。

      综上，，，，，，，，加州鲈饲料中bifa必发舒的建议添加量为0.075%（750g/T）。。。。。。。。

（集美大学）